多層オルガノイドの全体マウント深部イメージングとスケールを越えた解析のための定量的パイプライン

• ヒトiPSC由来神経前駆細胞を用いた付着性皮質オルガノイド(ACOs)の384ウェルプレートフォーマットを開発し、再現性の高い3次元皮質層形成と長期培養を実現したと発表

• マウス肝臓の3Dイメージングプラットフォームを用いて、肝門部層状複合体(PLC)が新たに特定・定義された

• ヒト多能性幹細胞由来オルガノイドを用いた、高スループット配列型CRISPR干渉スクリーニングプラットフォームが開発された
• 前部神経発生のオルガノイドモデルで77の転写因子をスクリーニングし、ZIC2、SOX11、ZNF521が神経管閉鎖に必須の調節因子であることを特定

• ヒトiPS細胞から腱節期への段階的分化プロトコルが確立された
• Wnt阻害剤の追加により神経オフターゲット細胞の除去と腱節誘導効率の向上が確認された

線虫 C. elegans を用いたパイロットスタディにおいて、ゲノム全体にわたるタンパク質タグ付けの実現可能性が検証された。本研究では、3つの異なる蛍光タグを同時に導入し、30個の遺伝子座をタグ付けすることを目指した。発現レベルの異なる必須遺伝子を選択することで、遺伝子機能の破壊やタグ付けされたタンパク質の可視性に関する課題が検討された。このタグ付け手法は非常に効率的であり、タンパク質の発現および局在の予期せぬ細胞内・細胞小器官レベルでのパターンが明らかになった。本研究は、より多くの遺伝子座、最終的にはゲノム全体へのタグ付け手法のスケールアップを促進することが期待される。