Cas9と条件付きで不死化された好中球前駆細胞を用いた、好中球分化と機能のゲノムワイドCRISPRスクリーニングツール

研究者らは、Cas9とER-Hoxb8を発現する好中球前駆細胞株を開発し、好中球のフォワードおよびリバース遺伝子解析を可能にした。この前駆細胞株は、sgRNAによる導入とエストロゲンの除去により、Cas9編集された好中球を高効率で生成する。編集された前駆細胞は、in vitroおよびマウスモデルにおいて分化することが確認された。このツールを用いて、好中球分化に必要な因子を特定するためのプール化CRISPRスクリーニングを実施した結果、好中球分化に必須の転写因子であるCebpeや、WASH複合体の全構成要素などが同定された。このリソースは、好中球の疾患における役割を遺伝学的に解析することを初めて可能にする。